安徽工程大学学报

2016, v.31;No.99(02) 11-15

[打印本页] [关闭]
本期目录(Current Issue) | 过刊浏览(Past Issue) | 高级检索(Advanced Search)

pGEX-4T-2-A表达系统的构建及其融合蛋白GST-PlaA的表达优化
Construction of expressive system pGEX-4T-2-A and the expression and optimization of its GST-PlaA fusion protein

刘开放;薛正莲;王洲;

摘要(Abstract):

构建pGEX-4T-2-A表达质粒来获得融合蛋白GST-PlaA.PCR扩增粘质沙雷氏菌PL-06磷脂酶A1基因PlaA,定向克隆到pGEX-4T-2载体上.重组质粒转化至大肠杆菌JM109菌株中,进行阳性克隆的筛选并测序.将测序正确的质粒转化到表达菌株BL21(DE3)PLysS中,经IPTG诱导并进行SDS-PAGE分析,验证融合蛋白GST-PlaA的表达,同时优化培养条件.pGEX-4T-2-A表达质粒构建成功,其融合蛋白GST-PlaA以包涵体形式表达.在OD值为0.8时加入终浓度为0.5mM的IPTG,37℃诱导8h时,融合蛋白GST-PlaA表达量最高.为磷脂酶A1蛋白的纯化与功能研究奠定了基础.

关键词(KeyWords): 磷脂酶A1;融合蛋白;SDS-PAGE;表达条件

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金资助项目(31471615,31501465)

作者(Author): 刘开放;薛正莲;王洲;

Email:

DOI:

扩展功能
本文信息
服务与反馈
本文关键词相关文章
本文作者相关文章
中国知网
分享